ISOLASI MIKROBA
Isolasi mikroba adalah suatu proses pemisahan mikroorganisme yang
berasla dari lingkungannya dan dipindahkan ke lingkungan yang baru. Teknik
isolasi mikroorganisme adalah suatu usaha untuk menumbuhkan mikroba diluar dari
lingkungan lamiahnya. Pemisahan mikroorganisme dai lingkungan ini bertujuan untuk
memperoleh biakan bakteri yang sudah tidak bercampur lagi dengan bakteri
lainnya dan disebut biakan murni. Prinsip dari isolasi mikroba adalah
memisahkan satu jenis mikroba dengan mikroba lainnya tang berasal dari camouran
bermacam-macam mikroba. Hal ini dapat dilakukan dengan menumbuhkannya dalam
media padat, sel-sel mikroba akan membentuk koloni sel yang tetap pada
tempatnya. Isolasi dilakukan pada bakteri Lactobacillus casei yang diambil dari susu fermentasi (Yakult).
Bakteri Lactobacillus casei diisolasi
pada media nutrient agar mengingat bahwa sumber utama yang dibutuhkan bakteri.
Nutrient agar mengandung protein. Nutrient agar mengandung protein yang
dibutuhkan.
Lactobacillus casei adalah genus bakteri gram positif,
anaerobik fakultatif atau mikroaerofilik. Genus bakteri ini membentuk sebagaian
besar dari kelompok bakterii asam laktat, dinamakan demikian karena kebanyakn
enggotanya dapat merubah laktosa dan gulalainnya menjadi asam laktt. Kebanyakan
dari bakteri ini umum dan tidak berbahaya bagi kesehatan. Dalam manusia,
bakteri ini dapat ditemukan di dalam vagina dan sistem pecernaan, dimana mereka
bersimbiosis dan merupakan sebagian kecil dari florausus.
Metode isolasi terbagi dua yaitu metode cawan gores dapat
dilakukan dengan berbagai macam bentuk seperti bentuk T, kuadran, radian dan
zigzag. Goresan T dan kuadran merupakan cara yang digunakan untuk mendapatkan
koloni yang benar-benar terpisah dari koloni lain, sehingga mempermudah proses
isolasi. Metode ini mempunyai dua keuntungan, yaitu menghemat bahan dan waktu.
Metode cawan gores yang dilaksanakan
dengan baik kebanyakan akan menyebabkan terjadi terisolasinya
mikroorganisme yang diinginkan. Pada metode tabung tuang dilakukan pada tabung
raksi dengan membuat agar datar dan agar miring. Untuk agar datar melakukan
isolasi dengan car tusuk. Untuk agar miring melakukan isolasi dengan cara
zigzag.
Selain itu terdapat juga dua cara mengisolasi mikroba
yakni agar tegak dan agar miring. Agar miring adalah media agar pada tabung reaksi yang
diletakkan miring pada saat pendinginan. Agar miring pada saat pendinginan.
Agar miring ini merupakan salah satu cara yang mudah untuk biakan murni mikroba
bersifat aerob. Agar tegak adalah media agar dalam tabung reaksi yang
diletakkan tegak pada waktu pandinginan. Agar ini digunakan untuk baiakan
murnimikroba kekurangan oksigen atau bersifat anaerob fakultatif.
Alat-alat yang digunakan dalam proses isolasi yaitu ose
bundar dan ose jarum. Ose bundar digunakan untuk mengambil mikroba dari media
sumber lalu digoreskan ke agar miring dan padda media dalam cawan petri.
Sedangkan untuk ose tusuk digunakan untuk menngisolasi mikroba pada media agar
tegak dengan cara ditusukkan pada media.
Cara melakukan isolasi mikroba yaitu dengan cara dituangkan ke dalam cawan petri dan
tabung reaksi. Untuk cawan petri, media dituangkan kemudian didiamkan
hingga mengeras dan lakukan isolasi dengan cara radian dan kuadran dengan
menggunakan ose bundar. Untuk tabung reaksi media MRS dituangkan kemudian
didiamkan hingga mengeras. Setelah mengeras lakukan isolasi dengan cara tusuk
untuk agar datar dengan enggunakan ose jarum dan cara zigzag untuk agar miring
dengan menggunakan ose buundar. Dan yang terakhir lakukan inkubasi dalam 6x24
jam.
DAFTAR PUSTAKA
Nurihainah. 2007. media.
Jakarta: UIPress.
Zahro, F. 2014. Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Asal Fermentasi Markisa
Ungu (Pasiflora udils war. Sims)
Sebagai Penghasil Eksopolisakarida. Universitas Islam Negeri Maulan Malik
Ibrahim, Malang
Hadioetomo, R.S 1993 Mikrobiologi dasar Dalam Praktif : Teknik
dan Prosedur Dasar Laboratorium. PT Gramedia Pustaka Utama, Jakarta
Gandjar, IRK. 1992 Pedoman Praktikum Mikrobiologi dasar .Jurusan Biologi FMIPA
Universitas Indonesia. Depok
Sangat bermanfaat :)
BalasHapusSangat bermanfaat :)
BalasHapusmantap jiwa kakak
BalasHapuslike like like
BalasHapus